1??前言

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苯醚甲環(huán)唑是一種廣譜高效的殺菌劑 ，主要抑制病菌細胞麥角甾醇的生物合成 ，從而破

壞細胞膜結(jié)構(gòu)與功能。主要用于果樹 ，蔬菜 ，瓜類等作物 ，對蔬菜和瓜果等多種真菌性病害?具有很好的保護和治療作用 ，是*類殺菌劑中安全性比較高的。葉面處理或種子處理都可?提高作物的產(chǎn)量和保證品質(zhì)。蔬菜瓜果作為人們?nèi)粘ｏ嬍辰】档臄z入物質(zhì) ，其藥物殘留量的?顯得至關(guān)重要。本文用JH570全自動固相萃取儀對菠菜中苯醚甲環(huán)?殘留量的?整個檢測過程中的凈化環(huán)節(jié)進行了實驗。

2 ?儀器與試劑

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2.1 ?儀器

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JH570全自動固相萃取儀、氣相色譜-質(zhì)譜儀、組織搗碎機、離心機、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)

儀、振蕩器

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2.2 ?試劑及耗材

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乙酸乙酯、丙酮、正己烷、無水硫酸鈉、活性炭固相萃取小柱（ 3ml ，填充物 250mg ）、

中性氧化鋁固相萃取小柱（ 3ml ，填充物 250mg ）

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正己烷-丙酮（ 3+2 ）溶液 ：取?300 ?mL 正己烷 ，加入?200??mL ?丙酮 ，搖勻備用。

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3 ?實驗方法

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3.1 ?實驗步驟

3.1.1 ?取樣

菠菜樣品用組織搗碎機加工成漿狀 ，混勻備用。

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3.1.2 ?提取

準(zhǔn)確稱取?10g 均勻試樣(至 0.01g)于?100mL 錐形瓶中 ，加入 50mL?乙酸乙酯 ，再加入

15g 無水硫酸鈉 ，放置于振蕩器上振蕩 40min 后過濾。再向錐形瓶中加入 20mL?乙酸乙酯重?復(fù)提取一次 ，合并提取液 ，于 40℃下減壓濃縮至干。用 3mL 正己烷溶解 ，待凈化。

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（提取液）

3.1.3?固相萃取小柱凈化

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將收集的洗脫液置于 40℃下氮氣流吹至干。*用正己烷定容 1mL ，并過 0.45um 有機

相濾膜 ，供氣相色譜-質(zhì)譜測定和確證。

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3.1.4 氣相色譜-質(zhì)譜測定條件

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色譜柱 ：石英彈性毛細管柱 DB-17ms ，30m*0.25mm（ i.d.?），膜厚 0.25um ，或相當(dāng)者 ；?色譜柱溫度 ：200℃以?10℃/min 上升至 300℃?,?保持?10min ；

進樣口溫度 ：300℃?;

色譜-質(zhì)譜接口溫度 ：280℃?;

載氣 ：氦氣（純度＞99.999%?），1mL/min ；?進樣量 ：1uL ；

進樣方式 ：無分流進樣 ，1.5min?后開閥 ；?電離方式 ：NCI ；

電離能量 ：216.5ev ；?離子源溫度 ：150℃?;?四極桿溫度 ：150℃?;

反應(yīng)氣 ：甲烷 ，純度大于等于 99.99% ；反應(yīng)氣流速 ，2mL/min;?測定方式 ：選擇離子監(jiān)測方式 ；

選擇監(jiān)測離子（ m/z）?：定量離子 348, ；定性離子 310,350,405?溶劑延遲 ：12min。

3.1.5 ?色譜測定與確證

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根據(jù)樣液中苯醚甲環(huán)唑含量的情況 ，選定峰面積相近的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液 ，對標(biāo)準(zhǔn)工作液和???樣液等體積參插進樣。標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣液中苯醚甲環(huán)唑的相應(yīng)值均應(yīng)在儀器的線性范圍內(nèi)。?如果樣液與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的選擇離子色譜圖中 ，在相同保留時間處有色譜峰出現(xiàn) ，并且在扣???除背景后的樣品質(zhì)量色譜圖中 ，所選離子均出現(xiàn) ，所選擇離子的豐度比與標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)離子的???豐度比 ，其值在允許范圍內(nèi)（允許范圍見下表）。在測定條件下, ?苯醚甲環(huán)唑的保留時間是?1???5.74 ?min ，其監(jiān)測離子(m/z)豐度比為 310 ：348 ：350 ：405=45 ：100 ：?67 ：13 對其進行確證 ；?根據(jù)定量離子 m/z348 對其進行外標(biāo)量。

使用氣相色譜-質(zhì)譜定性時相對離子豐度*容許誤差

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4 ?結(jié)果與討論

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4.1 ?實驗過程為 A/B?串柱類型 ，經(jīng)過活性炭固相萃取 A 柱的樣品溶液上樣后直接收集 ，收集

液再過中性氧化鋁固相萃取 B 柱 ，用潤洗液對收集管潤洗兩次后一起過 B 柱 ，*將目標(biāo)物?從 B 柱洗脫。

4.2 ?上樣過程中的 2mL/min?的流速為國標(biāo)中明確要求。

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4.3 ?洗脫前需要對小柱進行抽干 ，通過設(shè)置 600s 的氮吹時間實現(xiàn)。

4.4 ?用固相萃取法凈化菠菜中苯醚甲環(huán)?殘留量的凈化過程實現(xiàn)自動化處理 ，減少人力的消 耗 ，實驗過程中使用的有機溶劑采用密封處理 ，降低了對人體的傷害且儀器能*的控制活?化、上樣、洗脫等溶劑流速 ，使樣品凈化的更為充分。

參考文獻

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[?1]GB ?23200.49-2016 ?食品安全*標(biāo)準(zhǔn)?食品中苯醚甲環(huán)?殘留量的測定?氣相色譜-質(zhì)譜法

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注意事項

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1、實驗過程中用到的無水硫酸鈉需在 650℃灼燒 4h 后備用。

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2、樣品提取液過濾后 ，用?10mL?的乙酸乙酯沖洗濾紙 ，合并濾液備用。

3、蒸干后的樣品用溶劑溶解轉(zhuǎn)移至?10mL 樣品管后 ，需用 3mL 相同的溶劑充分潤洗錐形瓶 ，

并將洗液一同倒入樣品管作為上樣溶液。

4、兩次上樣都應(yīng)當(dāng)對樣品管進行潤洗 ，60mL/min?的潤洗速度可實現(xiàn)噴淋潤洗 ，充分將樣品?管壁上殘留的樣品溶液洗下后過柱 ，防止殘留的樣品液對后續(xù)檢測結(jié)果造成影響。

5、活性炭小柱活化時活化液流出速度緩慢 ，需設(shè)置 5mL?的空氣助推使活化液充分浸潤小柱?后流下。

6、?目標(biāo)物洗脫時將儀器空氣助推適當(dāng)增加 ，保證殘留在柱內(nèi)的洗脫液完全流出。

7、實驗中用到有毒有害試劑 ，應(yīng)當(dāng)于通風(fēng)櫥內(nèi)進行 ，同時實驗人員需做好防護措施。