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電位滴定法測定酵母粉中氨基酸態(tài)氮含量
一、 前言
酵母粉是酵母沒有經(jīng)過分解,但酵母浸粉的營養(yǎng)物質(zhì)得到過分解的物質(zhì),微生物吸收利用的速度和效率更高,發(fā)酵殘留少, 憑借其優(yōu)點(diǎn)在傳統(tǒng)的抗生素等發(fā)酵行業(yè)應(yīng)用較廣泛。本實(shí)驗(yàn)根據(jù)食品安全*標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 5009.235-2016 食品中氨基酸態(tài)氮的測定》中對于酵母粉中氨基酸態(tài)氮含量進(jìn)行測試,采用電位滴定法檢測酵母粉中氨基酸態(tài)氮含量, 具有操作簡單, 結(jié)果準(zhǔn)確, 精度高等優(yōu)點(diǎn)。
二、儀器與試劑
2.1、儀器
JH-T7全自動電位滴定儀, 復(fù)合 PH 電極, 容量瓶, 分析天平等
2.2、試劑
c=0.1mol/L 的 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)滴定液, 甲醛溶液(37%) , 去離子水
三、 實(shí)驗(yàn)方法
3.1、實(shí)驗(yàn)過程
3.1.1. 準(zhǔn)備過程:用 PH=4.01、6.86、9.18 的緩沖液校對 PH 電極。
3.1.2. 空白實(shí)驗(yàn)測試: 加入 50mL 去離子水(保證溶液高度沒過電極) 于滴定杯中, 放置電位滴定臺上, 開啟攪拌, 使樣品混合均勻。啟動編輯好氨基酸態(tài)氮空白測定的方法, 先滴定至 PH=8.2, 加入10mL 甲醛溶液(在方法中設(shè)置儀器可以自行添加甲醛),再滴定至 PH=9.2,記錄由 PH=8.2 到PH=9.2消耗的氫氧化鈉的滴定體積, 此為空白體積。
3.1.3. 酵母粉和蛋白胨測試過程: 準(zhǔn)確稱取 5g 待測試樣于 100mL 容量瓶中, 用去離子水溶解, 定容
至刻度線等待測試。用 5mL 移液管準(zhǔn)確移取溶解好的試樣 5mL 置于滴定杯中, 加 50mL(保證溶液高度沒過電極) 的去離子水, 放置電位滴定臺上, 開啟攪拌, 使樣品混合均勻。啟動編輯好的方法,先滴定至 PH=8.2,加入 10mL 甲醛溶液(在方法中設(shè)置儀器可以自行添加甲醛), 再滴定至 PH=9.2,記錄由 PH=8.2 到 PH=9.2 消耗的氫氧化鈉的滴定體積, 減去步驟 2)測試的空白體積, 計算樣品的氨基酸態(tài)氮含量。
3.2、儀器參數(shù)如表所示:
表 1 氨基酸態(tài)氮測定滴定儀參數(shù)設(shè)置
滴定類型: | 終點(diǎn)滴定 | 方法名: | 氨基酸態(tài)氮含量測定 |
滴定管體積: | 10mL | 樣品計量單位: | g |
工作電極: | PH 復(fù)合電極 | 參比電極: | 無 |
攪拌速度: | 7 | 預(yù)攪拌時間: | 5s |
快滴平衡時間: | 4s | 快滴平衡電位: | 1mv |
慢滴平衡時間: | 6s | 慢滴平衡電位: | 1mv |
慢滴體積: | 0.02mL | 快滴體積: | 0.5mL |
滴定前平衡電位: | 10mV | 結(jié)束體積: | 20mv |
終點(diǎn)值 1(PH): | 8.2(延時 10s) | 預(yù)控值: | 7 |
終點(diǎn)值 2(PH): | 9.2(延時 10s) | 預(yù)控值: | 8 |
相關(guān)系數(shù): | 1.4 | 結(jié)果單位: | g/100g |
滴定劑名稱: | 氫氧化鈉 | 理論濃度: | 0.1 |
輔助試劑: | 甲醛 | 添加體積: | 10mL |
參考終點(diǎn): | 1 | 添加時間: | 滴定中 |
四、結(jié)果與討論
4.1、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
樣品經(jīng)測試, 得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表 2 所示:
表 2 氨基酸態(tài)氮含量測定
樣品名稱 | 稱樣量(g) | 取樣量(mL) | c(NaOH)/ mol/L | 滴定體積V1/mL | 滴定體積 V2/mL | 空白體積 V0/mL | 氨基酸態(tài)氮(g/100g) | 平均值 (g/100g) |
RSD(%) |
酵母粉 |
5.0039 |
5 |
0.09864 | 2.000 | 12.100 |
0.760 | 5.155 |
5.1697 |
0.325 |
1.940 | 12.100 | 5.188 | |||||||
1.940 | 12.060 | 5.166 |
4.2、結(jié)論
本次測試通過 JH-T7電位滴定儀測定酵母粉含量,數(shù)據(jù)重復(fù)性好,而且使用儀器判斷減少了人工誤差,大大提高了實(shí)驗(yàn)的精度。并且可以使用輔助模塊添加甲醛溶液, 既提高了實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性, 又減少了有害試劑和人接觸的時間, 因此電位滴定法是該類樣品的不錯選擇。